en fr The regulation of type III secretion system of Pseudomonas aeruginosa Régulation du Système de Sécrétion de Type III de Pseudomonas aeruginosa Report as inadecuate




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1 GREPI - Groupe de Recherche et d-Etudes du Processus Inflammatoire

Abstract : Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen that causes acute and chronic infections in hospitalized individuals, burn victims, and cystic fibrosis patients. One of the virulence factors most strongly correlated with severe infection both in animal models and in human patients is the type III secretion system TTSS.We have observed a previously identified protein, PsrA, necessary for full activation of TTSS gene expression in P. aeruginosa. Electrophoretic mobility shift assays showed that recombinant PsrA could bind to the exsCEBA promoter region. Mutant with a deletion in the psrA gene showed a marked decrease in the secretion of the type III effectors and weak resistance to phagocyte-like PLB-985 cells. Taken altogether, these results suggest that PsrA is a newly identified activator that is involved in the expression of the TTSS by enhancing the exsCEBA transcriptional level.In the second time, we found that an inhibitory signal, which is similar but not known quorum sensing signal, produced in the stationary phase culture supernatant, can repress in vitro the expression of TTSS. The analysis of thousands of transposon insertion mutants showed that the production of this signal might depend on the tryptophan, which is the precursor of many metabolites, such as indole-3-acetic acid IAA. IAA sodium salt IAA-Na and one of IAA-like compound, 1-naphthaleneacetic acid potassium salt NAA-K can indeed inhibit the expression and the secretion of the TTSS at millimolar concentrations. The precise identification of this signal requires more investigations.

Résumé : Pseudomonas aeruginosa est un pathogène opportuniste responsable d-infections graves chez les personnes immunodéprimées, les grands brûlés et les patients atteints de la mucoviscidose. Cette pathogénicité repose sur de nombreux facteurs de virulence dont le système de sécrétion de type III SSTT.Nous avons observé une protéine précédemment identifiée, PsrA, nécessaire pour la pleine activation de l-expression du SSTT chez P. aeruginosa. Les analyses par retard de migration électrophorétique de fragments du promoteur de l-operon régulateur exsCEBA ont montré que la protéine recombinante PsrA pourrait se fixer sur celui-ci. Le mutant DpsrA a montré une diminution marquée de la sécrétion des effecteurs de type III et une faible résistance à la bactéricidie par des cellules de type phagocytaires, PLB-985. L-ensemble des résultats suggèrent que PsrA est un nouvel activateur qui est impliqué dans l-expression du SSTT en augmentant le niveau de la transcription d-exsCEBA.Dans un second temps, nous avons mis en évidence qu-un signal inhibiteur, de type quorum sensing inconnu et produit dans la phase stationnaire de la culture, peut réprimer l-expression du SSTT in vitro. L-analyse de milliers de mutants de transposition a montré que la production de ce signal dépend du tryptophane, qui est le précurseur de nombreux métabolites dont l-acide d-indole-3-acétic IAA. IAA-Na et un autre membre de cette famille de molécules, le acide 1-naphthalenacétique NAA-K aux concentrations millimolaires peuvent en effet inhiber l-expression et la sécrétion du SSTT. L-identification précise de ce signal nécessite des investigations plus poussées.

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Mots-clés : Pseudomonas aeruginosa le système de sécrétion de type III régulation PsrA quorum sensing

keyword : type III secretion system





Author: Dakang Shen -

Source: https://hal.archives-ouvertes.fr/



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