en fr Dynamics of N-cadherin and L1 neuronal adhesions in axonal growth and synaptogenesis Etude de la dynamique des adhésions neuronales N-cadhérine et L1 dans la croissance axonale et la synaptogenèse Report as inadecuate




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1 PCS - Physiologie cellulaire de la synapse

Abstract : During the developmental process of axonal elongation and synaptogenesis, adhesion proteins such as cadherins and Ig-CAMs play a fundamental role by mediating neuronal contacts. In order to study the dynamics of these contacts and their role in these processes, we used imaging techniques : thrombin cleavage, FRAP, optical tweezers, quantum-dots, to observe live hippocampal primary neurons, which were associated to a semi-artificial system of microspheres coated with purified adhesion proteins N-cadherin and L1. Using a L1 construct bearing an extracellular thrombin cleavable GFP, I could determine how the processes of diffusion and exo- endocytosis were involved in the dynamics of L1-dependant contacts and obtain quantitative data concerning L1 homophilic interaction. I also contributed to characterise the extracellular link between N-cadherin and GluR2, an AMPAR subunit, and the influence of N-cadherin expression on GluR2 mobility. The interaction between these two proteins could be implicated in the formation and-or the maturation of synapses.

Résumé : Lors des processus développementaux d-élongation axonale et de synaptogenèse, les protéines d-adhésion telles les cadhérines ou les Ig-CAM jouent des rôles fondamentaux en permettant la formation de contacts entre neurones. Pour étudier la dynamique de ces contacts et leurs rôles dans ces processus, nous avons mis en œuvre des techniques d-imagerie sur des neurones primaires d-hippocampe clivage thrombine, FRAP, pinces optiques, quantum-dots, ceux-ci étant associés à un système semi-artificiel de microsphères recouvertes de protéines d-adhésion purifiées N-cadhérine et L1. En utilisant une construction L1 portant une étiquette GFP extracellulaire clivable à la thrombine, j-ai pu précisé l-implication des processus de diffusion membranaire et d-exo- endocytose dans la dynamique des contacts L1-dépendants et obtenir des données quantitatives relatives à l-interaction homophile L1. J-ai également contribué à caractériser la liaison extracellulaire entre N-cadhérine et GluR2, sous-unité des récepteurs AMPA, et l-influence de l-expression de la N-cadhérine sur la mobilité de GluR2. L-interaction entre ces deux protéines pourrait être impliquée dans la formation et-ou la maturation des synapses.

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Keywords : Neuron Hippocampus Growth cone Membrane traffic Synaptogenesis N-cadherin Optical tweezers

Mots-clés : Adhésion Neurone Hippocampe Cône de croissance L1 L1-CAM Ig-CAM Trafic membranaire TI-VAMP Synapse Synaptogenèse N-cadhérine GluR2 AMPAR Diffusion FRAP Pinces optiques Quantum-Dots





Author: Caroline Pruvost Née Dequidt -

Source: https://hal.archives-ouvertes.fr/



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